产品货号:
WE0503
中文名称:
Bst2.0 DNA聚合酶
英文名称:
Bst 2.0 DNA Polymerase
产品规格:
1600U
发货周期:
1~3天
产品价格:
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Bst2.0 DNA聚合酶是通过大肠杆菌表达纯化的重组酶,其基因来源于Bacillus stearothermophilus,并在原始序列的基础上进行了部分点突变。该蛋白具有更强的5'→3'DNA聚合酶活性,链置换活性,逆转录活性,无5'→3'外切酶活性。应用于DNA等温扩增(LAMP)、多重置换扩增(MDA)、全基因组扩增(WGA)等。
在65℃,30分钟内,将10nmol脱氧核苷酸掺入到酸性不溶物质所需的酶量定义为1个活性单位(U)。
组分 | 规格 |
Bst2.0 DNA聚合酶(8U/μL) | 200μL |
10×Bst2.0 Reaction Buffer | 1.5mL |
100mM MgSO4 Solution | 1.5mL |
保存:-20℃
经过多次柱纯化,SDS-PAGE检测其纯度大于98%;经检测无外源核酸酶活性。
80℃加热5min即可失活。
等温扩增(LAMP)操作指南:
将下列组分按比例混合后置于65℃温育30~60min,80℃孵育5min失活。
成分 | 用量 | 终浓度 |
10×Bst2.0 Reaction Buffer | 2.5μL | 1×(含2mM MgSO4) |
100mM MgSO4 Solution | 1.5μL | 6mM(共8mM) |
dNTP Mix(10mM) | 3.5μL | 每种1.4mM |
FIP/BIP Primers(25×) | 1μL | 1.6μM |
F3/B3 Primers(25×) | 1μL | 0.2μM |
LoopF/B Primers(25×) | 1μL | 0.4μM |
Bst2.0 DNA聚合酶(8U/μL) | 0.5~1μL | 160~320U/mL |
DNA Sample | 可变 | >10 copies or more |
无菌水 | 至25μL | - |
- LAMP引物由4个或6个(含Loop)引物组成,25×引物包括:40μM FIP,40μM BIP,5μM F3,5μM B3,10μM LoopF,10μM LoopB;
- 如需优化反应,可调整Mg2+浓度(4~10mM),酶量或改变反应温度(60~72℃),该酶最适反应温度在65~68℃;
- 请勿剧烈振荡,剧烈的振荡混合会使酶失活;
- 加完体系确保反应体系中没有气泡。
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